【佳學基因檢測】分子診斷與基因檢測中各種不同的PCR技術
1.遞減PCR(touchdown PCR):前幾循環(huán)溫度逐漸下降。
2.逆轉錄PCR(RT-PCR):以由mRNA逆轉錄而來的cDNA 為模板,也因為是從表現型基因來進行增量的,由此產生出來的cDNA 產物不帶有內含子(基因中不具意義的段落),常應用于分子克隆技術。
3.熱啟動PCR(hotstart PCR):以高熱激活型核酸聚合酶進行反應,減少非專一性產物。
4.巢式PCR(nested PCR):先用低特異性引物擴增幾個循環(huán)以增加模板數量,再用高特異性引物擴增。
5.多重PCR(multiplex PCR):在同一個管中使用多組引物。
6.復原條件PCR(reconditioning PCR):PCR 產物稀釋 10 倍后重新放入原濃度的引物和dNTP 等循環(huán) 3 次,以消除產物中的異二聚體。
7.dsRNA 合成(dsRNA replicator):合并使用high-fidelity DNA polymersae、T7RNA聚合酶與Phi6 RNA replicase;從雙股 DNA轉錄為對應的雙股RNA(dsRNA)??蓱糜赗NAi實驗操作。
8.COLD-PCR (co-amplification at lower denaturation temperature PCR):用以檢測突變或特殊等位基因的PCR 應用技術。
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